레드향잎추출물의항산화및항염효과연구
Antioxidant and Anti-Inflammatory Effects of Leave Extract from Citrus reticulata ' Kanepi '
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초록
본 연구에서는 버려지는 레드향 잎을 천연 소재로써 활용하기 위해 항산화, 항염 효과를 검증하고자 하였다. 먼저 레드향 잎 열수 및 70% 에탄올 추출물의 폴리페놀 측정결과, 각각 372.41 ± 0.94 mg TAE/100 g, 372.20 ± 0.87 mg TAE/100 g의 함량을 확인하였다. 항산화 활성을 측정하기위해 전자공여능과 ABTS radical 소거능을 측정하였으며, 전자공여능 측정 결과, 레드향 잎 열수 및 70% 에탄올 추출물은 1,000 μg/ml 농도에서 각각 73% 이상의 활성을 나타내었고, ABTS radical 소거능 측정 결과, 두 추출물 모두 대조군인 ascorbic acid와 유사한 99% 이상의 우수한 활성을 나타내었다. 이후 항염 측정을 위해 대식세포에서의 세포 생존율을 측정하였으며, 95% 이상의 생존율을 보인 농도 구간을설정하여 이후 실험을 진행하였다. LPS로 자극한 대식세포인 RAW 264.7 세포를 사용하여 NO 생성 저해 활성을 측정한 결과, LPS 단독처리군 대비 레드향 잎 열수 및 70% 에탄올 추출물은 100 μg/ml 농도에서 각각 19.86%, 23.94%의 저해 활성 효과를 확인할 수 있었다. 항염증 관련 인자인 iNOS 와 COX-2의 단백질 발현량을 측정한 결과, 레드향 잎 열수추출물은 LPS 단독처리군 대비 100 μg/ml에서 iNOS, COX2 각각 42.2%, 32.82%의 발현이 억제되었으며, 레드향 잎70% 에탄올 추출물은 iNOS, COX-2 각각 27.93%, 22.56% 의 발현 억제 효과가 있음을 확인하였다. 또한, iNOS와 COX-2의 mRNA 발현량 측정 결과, 100 μg/ml 농도에서LPS 단독처리군 대비 레드향 잎 열수 추출물은 iNOS, COX2 각각 90.67%, 39.16%의 저해되었으며, 레드향 잎 70% 에탄올 추추물은 2.63%, 71.77%의 저해활성을 확인하였다. 이에 본 연구 결과를 바탕으로 레드향 잎 열수 및 70% 에탄올추출물은 항산화 및 항염증 활성이 우수함을 확인할 수 있었으며, 천연물 소재를 활용하여 식품, 의약품, 화장품 등의다양한 소재로 활용가능성이 있을 것으로 사료된다.
Abstract
In this study, hot distilled water (CLD) and 70% ethanol (CLE) extracts of Citrus reticulata 'Kanpei' leaves were prepared to evaluate their potential as natural functional materials by assessing antioxidant and anti-inflammatory activities. Antioxidant effects were measured using electron donating ability measurement and 2,2'-azino-bis 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid radical scavenging analysis, and both extracts showed increased concentration-dependent antioxidant activity. RAW 264.7 cells were used to confirm the anti-inflammatory activity. As a result of measuring nitric oxide inhibition activity, CLD and CLE showed an inhibitory effect of 19.97% and 23.95%, respectively, at 100 μg/ml compared to the group treated with lipopolysaccharide alone. Western blot analysis showed that both extracts reduced the expression of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in a concentration-dependent manner. These findings suggest that C. reticulata 'Kanpei' leaves extract has antioxidant and anti-inflammatory effects and has the potential to be developed as a new natural material.