RBL-2H3 비만세포의 알레르기 염증 반응에 미치는 生料四物湯의 영향
Suppressive effect of SaengRyoSaMulTang on activated RBL-2H3 mast cells
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Objectives : 생료사물탕은 한의학에서 항알레르기 효과로 알려져 있지만 작용 기전 및 타겟 세포는 아직 밝혀지지 않았다. 이 연구는 생료사물탕의 억제 효능을 밝히기 위해 기술되었다. Methods : 본 연구에서 우리는 세포독성을 분석하였고 real-time PCR을 이용하여 IL-4, IL-13 mRNA 유전자 발현을 측정하였으며, ELSA를 이용하여 IL-4, IL-13 생산을 분석하였다. 또한 GATA-1, GATA-2, NF-AT1, NF-AT2, AP-1 and NF-κB p65과 같은 전사인자의 발현을 western blotting법으로 분석하였다. Results : RBL-2H3 비만세포에 생료사물탕을 처리한 결과 PI로 유도된 IL-4와 IL-13을 포함하는 Th2 사이토카인에 용량에 따라 현저한 억제효과가 있음을 밝혀냈다. IL-4와 IL-13의 mRNA 유전자 발현은 100㎍/㎖ 용량에서 생료사물탕에 의해 현저하게 억제되었으며 PI로 유도된 IL-4와 IL-13 생성도 억제하였다. IL-4와 IL-13 유전자 발현을 포함하는 전사인자의 western blot 결과는 GATA-1, GATA-2, NF-AT2, c-Jun, c-Fos를 포함하는 비만세포 전사인자의 발현을 억제하나 NF-κB p65 는 억제하지 않는 것으로 나타났다. Conclusions : 우리는 생료사물탕이 비만세포에서 GATA-1, GATA-2, NF-AT2, c-Jun, c-Fos와 같은 전사인자를 조절하는 것을 통해 IL-4, IL-13과 같은 Th2 사이토카인을 억제하여 항알레르기 효과를 발휘하는 것으로 사료된다.
Abstract
Objectives : SaengRyoSaMulTang is a herbal formula in Oriental Medicine, known anti-allergens. However, its mechanism and cellular targets have not been found yet. Thus the study has developed to investigate the suppressive effect of SaengRyoSaMulTang. Methods : In the study, cellular viability, IL-4, IL-13 mRNA expression, IL-4, IL-13 production, manifestations of GATA-1, GATA-2, NF-AT1, NF-AT2, AP-1 and NF-κB p65 transcription factors were examined by Real-Time PCR, ELISA analysis and western blotting. Results : As a result of treating with SaengRyoSaMulTang extract(SRSMT), the study has shown that the amount of Th2 cytokines, which include PI induced IL-4 and IL-13, plays a significant role in suppressing effect. RBL-2H3 mast cells significantly suppressed the PI-induced Th2 cytokine production including IL-4 and IL-13 in a dose dependent manner. PI-induced IL-4 and IL-13 production was significantly suppressed by SRSMT intervention. Western blot analysis of transcription factors involving IL-4 and IL-13 expression also revealed a prominent decreases of mast cell's specific transcription factors including GATA-1, GATA-2, NF-AT2, c-Jun and c-Fos, but NF-κB p65. Conclusions : The study suggests that the anti-allergenic activities of SRSMT may regulate the transcription factors GATA-1, GATA-2, NF-AT2, c-Jun and c-Fos inhibiting Th2 cytokines IL-4 and IL-13 in mast cells.
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