Fisetin의 항산화 및 항비만 활성 평가를 통한 미용기능식품 소재로서의 가능성 탐색
Potential of Fisetin as a Nutri-cosmetics Material through Evaluating Anti-oxidant and Anti-adipogenic Activities
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목적: 비록 fisetin의 다양한 생리활성이 보고되었음에도 불구하고, fisetin의 미용기능식품 소재로서의 가능성에 대한 연구는 미비한 실정이다. 그러므로, 본 연구에서는 fisetin의 항산화 활성 및 3T3-L1 세포에서 fisetin의 항비만 활성을 평가하고, 더 나아가 미용기능식품 소재로서 fisetin의 가능성에 대해 고찰하였다. 방법: Fisetin의 항산화 활성은 ABTS 라디칼 소거능을 통해 평가하였다. 3T3-L1 세포에서 fisetin의 세포독성은 EZ-cytox assay 를 이용해 분석하였으며, fisetin의 지방축적 억제활성은 triglyceride 함량 분석을 통해 평가하였다. 또한 fisetin이 지방세포 분화전기(Day -2~0), 분화초기(Day 0~2), 분화중기(Day 2~4), 분화후기(Day 4~6)와 같은 3T3-L1 adipogenesis의 다양한 단계 중어느 단계에서 억제 효과를 가지는지 ORO 염색법을 통해 알아보았다. 3T3-L1 세포에서 전사인자들의 mRNA 발현 수준은 RTPCR을통해 분석하였다. 결과: Fisetin은 항산화 물질로 잘 알려진 비타민C (L-ascorbic acid)보다 강한 ABTS 라디칼 소거활성을 나타내었다. 또한 fisetin 을 24 h 동안 처리하였을 때, 200 μM 이하의 농도에서 3T3-L1 세포생존율에 영향을 미치지 않았다. 따라서 fisetin을 100 μM 이하의 농도로 다음 실험에 이용하였다. 3T3-L1 세포에서 triglyceride 함량은 농도 의존적으로 감소시켰다. Fisetin이 adipogenesis 어떠한 단계에서 지방축적 억제활성을 나타내는지 알아보았을 때 분화전기(Day -2~0), 분화초기(Day 0~2), 그리고 분화중기(Day 2~4)에 가장 높은 억제활성을 나타내었다. 또한 fisetin에 의한 adipogenesis의 억제는 C/EBPβ, leptin, 그리고 adiponectin 의 감소된 mRNA 발현수준에 의한 것으로 사료된다. 결론: 본 연구는 fisetin이 항산화 및 항비만 활성을 통하여 미용기능식품 소재로서 충분히 활용될 수 있음을 시사한다
Abstract
Abstract Purpose: Although several physiological properties of fisetin have been reported, the potential of fisetin as a nutri-cosmetics material has been not considered. Therefore, anti-oxidant and anti-adipogenic effects in 3T3-L1 cells of fisetin were evaluated and its potential as a nutri-cosmetic ingredient was discussed. Methods: To test anti-oxidant activity of fisetin, ABTS radical scavenging assay was used and the cytotoxicity of fisetin in 3T3-L1 preadipocytes was evaluated by EZ-cytox assay. The inhibitory effect of fisetin against 3T3-L1 adipogenesis was evaluated in various stage of adipogenesis such as pre-adipogenic (Day -2~0), early (Day 0~2), intermediate (Day 2~4), and terminal stage (Day 4~6) by oil red o (ORO) staining. The mRNA expression levels of transcriptional factors were performed by RT-PCR analysis. Results: We observed that the scavenging activity of fisetin against ABTS radicals was stronger than that of ascorbic acid, a well-known soluble anti-oxidant. Fisetin treatment resulted in the decreased triglyceride content of 3T3-L1 cells in a dose-dependent manner. Lipid accumulation of 3T3-L1 adipocytes was significantly inhibited by fisetin treatment by 54.61%, 61.74%, 56.82%, and 26.67%, respectively when compared to adipocytes control. The anti-adipogenic effect of fisetin was strongly limited in the pre-adipogenic, early, and intermediate stages of 3T3-L1 adipogenesis. In addition, the fisetin treatment down-regulated mRNA expression levels of C/EBPβ, leptin, and adiponectin in mature 3T3-L1 adipocytes. Conclusion: These results suggested that fisetin has the potential as a nutri-cosmetic material which possess anti-oxidant and anti-adipogenic activities.
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