Shell Vail Culture를 이용한 단순포진 바이러스 분리

목적 : 세포배양을 이용한 Herpes simplex virus (HSV)의 진단은 가장 좋은 방법이기는 하지만, 일부 검체에서는 세포병리효과(cytophathic effect, CPE)를 관찰하기까지 많은 시간이 요구된다. 이에 연구자들은 HSV의 진단을 위하여 신속하고 예민한 배양 방법을 개발하였다.방법 : HSV 감염이 의심되는 13명의 환자에서 채취된 검체를연구에 사용하였다. Shell vial 내의 Vero 단층세포에 검체를 원침하여 접종한 후 배양하였으며, CPE는 도립-위상차 현미경으로5일간 매일 관찰하였다. 검체 접종 2일만에 HSV에 특이한 단클론항체를 이용하여 직접면역형광염색(direct immunofluorescencestain, DIF)을실시하였으며, DIF 염색에 음성인 검체는 shell vial내에 단층세포을 분쇄하여 새로운 shell vial에 재접종을 실시하였다. 중합효소연쇄반응(polymerase chanin reaction, PCR)법은모든 검체에서 실시하였다.결과 : CPE는 접종 후 1, 2, 3, 4 및 5일에 각기 30 (64%), 39(83%), 43 (92%), 44 (94%) 및 46 (98%)예에서 관찰되었다.DIF염색에서는 접종 2일 만에 46 (98%)예가 양성으로 발견되었다. DIF 음성인 검체를 재 접종한 결과 1일 만에 새로운 7예에서328 최태열이규택박해일 외 1인CPE를 관찰할 수가 있었다. PCR법에서 47 (100%)예가 양성으로 나타났다.