맥문동탕이 호흡기 점액의 생성 및 분비에 미치는 영향
Effect of Macmundongtang on Production and Secretion of Respiratory Mucus
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목적: 이 연구에서는 ATP, TNF-α, PMA or EGF로 자극된 MUC5AC 세포에서 뮤신의 분비와 기도 상피세포에서의 유전자 발현과 쥐의 기도 점액 상피세포에 맥문동탕이 어떠한 작용을 하는지 알아보았다. 재료 및 방법: ATP, PMA, EGF 또는 TNF-alpha로 자극된 MUC5AC 의 뮤신생성에 대한 맥문동탕의 영향을 알아보기 위해 30분간 맥문동탕으로 전처리한 NCI-H292 세포 융합체를 ATP (200μM) 또는 PMA (10ng/ml) 또는 EGF (25ng/ml) 또는 TNF-alpha (0.2nM)에 24시간 동안 처리하고 ELISA 방법과 RT-PCR 방법을 이용하여 결과를 측정하였다. 동시에 3주 동안 이산화황에 노출로 유발시킨 기도점액이 과다 생성된 쥐에게 2주동안 맥문동탕을 복용시킨 후 쥐의 기도배상세포에서 추출한 기도상피 점액세포를 PAS-alcian blue로 상피세포를 염색시킨 후 조직학적 분석을 통해 효과를 측정하였다. 맥문동탕의 세포독성의 가능성에 대해서는 쥐에게 경구복용을 시킨 후 혈청 GOT/GPT 측정을 통한 간기능 분석, 혈청 BUN농도 측정을 통한 신기능 분석, 실험동안의 쥐의 체중증가 측정을 통해 이루어졌다. 결과: (1) 맥문동탕은 NCI-H292세포에서 MUC5AC 의 뮤신생성과 유전자발현을 감소시킬뿐만 아니라 증가시키기도 하였다. (2) 맥문동탕은 쥐의 기도내 상피의 점액분비를 감소시키지 않았다. (3) 맥문동탕은 간과 신독성을 보이지 않았으며 실험동안 체중증량에 영향을 미치지 않았다. 결론 : 이 연구의 결과 맥문동탕은 기도 점액의 분비와 유전자 발현을 정상화시키는 기능이 있는 것으로 생각되며 많이 발견되는 음허와 동반되는 호흡기질환에 있어 경구복용이후 신독성이나 간독성 없이 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
Abstract
Objectives In this study, effects of Macmundongtang (MMT) on ATP or TNF-α or PMA or EGF induced MUC5AC mucin production and gene expression from human airway epithelial cells and the increase in airway epithelial mucosubstances of rats were investigated. Materials and Methods Confluent NCI-H292 cells were pretreated for 30min in the presence of MMT and treated with ATP (200 μM)or PMA (10 ng/㎖) or EGF (25 ng/㎖) or TNF-α (0.2 nM) for 24hrs, to assess the effect of MMT both on ATPor PMA- or EGF- or TNF-α-induced MUC5AC mucin production using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)and on gene expression by the same inducers using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). At the same time, hypersecretion of airway mucus was induced by exposure of rats to SO2 during 3 weeks. Effect of orally-administered MMT during 2 weeks on increase in airway epithelial mucosubstances from tracheal goblet cells of rats was assesed using histopathological analysis after staining the epithelial tissue with PAS-alcian blue. Possible cytotoxicity of MMT was assessed by investigating the potential damage of kidney and liver functions by measuring serum GOT/GPT activities and serum BUN concentration of rats and the body weight gain during experiment,after administering MMT orally. Results (1) MMT did not only inhibit but also increased MUC5AC mucin productions and expression levels of MUC5AC gene from NCI-H292 cells. (2) MMT did not decrease the amount of intraepithelial mucosubstances of trachea of rats. (3) MMT did not show renal and hepatic toxicities and did not affect body weight gain of rats during experiment. Conclusions The result from the present study suggests that MMT might normalize the production and gene expression of airway mucin observed in various respiratory diseases accompanied by yin-deficiency, without in vivo toxicity to liver and kidney functions after oral administration.
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