3T3-L1 세포에서 칡잎 에탄올 추출물의 지방합성 저해 효과
Anti-lipogenic Effect of Pueraria lobata Leaf Ethanol Extract in 3T3-L1 Cells
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초록
본 연구는, 칡잎 에탄올추출물이 3T3-L1 세포 분화과정에서 지방합성에 미치는 효능을 알아보기 위해, 8일간 3T3-L1지방전구세포를 분화 유도시키면서 이와 병행하여 칡잎 에탄올추출물을 8일간 처치하고 8일째에 분화된 3T3-L1 지방세포에 Oil red O 염색을 실시하여 지질축적 관찰 및 지질함량을 정량하였고, 지방합성인자인 ACC, FAS의 유전자발현을 확인하였다. 주요 결과는 다음과 같다. 칡잎 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량 및 총 플라보노이드 함량은 각각 21.6, 90.4 mg/g이었고, 전자공여능은 1000ppm에서 24.8%이었으며, 3T3-L1 지방전구세포에서 최대허용농도는 100 ppm으로 확인되었다. Oil red O 염색 관찰에서,8일간 분화시킨 3T3-L1 지방세포인 대조군에 비해 칡잎 에탄올 추출물 25~100 ppm 처치군은 농도 의존적으로 지질축적이 적음을 확인하였고, 지질축적 정도를 정량 분석한 결과, 대조군에 비해 칡잎 에탄올 추출물 25 ppm, 50 ppm, 100ppm 처치군은 농도 의존적으로 각각 60.0%, 71.1%, 73.3%유의하게(p.0.001) 지질함량이 낮게 나타나 지질축적 저해효능이 있음을 확인하였다. GPDH의 활성 측정 결과, 대조군에 비해 칡잎 에탄올 추출물 25 ppm, 50 ppm 처치군은 각각 16.8%, 17.9% 유의하게(p.0.01) 낮아, 칡잎 에탄올 추출물은 효과적으로 지방세포분화 및 지방합성을 저해하는 효능을 갖고 있음을 확인하였다. ACC 유전자 발현에서, 대조군에 비해 칡잎 에탄올 추출물 25 ppm, 50 ppm 처치군은 각각 34.6%, 33.3% 유의하게(p.0.01) 낮았고, FAS 유전자 발현에서는, 대조군에 비해 칡잎 에탄올 추출물 25 ppm, 50 ppm 처치군은 각각 7.1%, 12.2% 낮아, 칡잎 에탄올 추출물은 3T3-L1 지방전구세포에서 지방합성을 저해함을 확인하였다. 이상의 결과를 종합하면, 칡잎 에탄올 추출물은 3T3-L1지방세포 분화과정에서 지방합성 주요인자인 ACC와 FAS의 유전자를 하향 발현시키고, 지방분화 및 지방합성에 관여하는 GPDH의 활성을 저해시켜, 지질축적을 저해하는 효능을 지님을 확인하였다. 이는 기존의 연구보고를 고려 할때, 칡의 주요 성분인 제니스테인과 다이드제인이 지질축적저해 작용에 기여한 것으로 생각된다.
Abstract
In this study, we investigated the effects of Pueraria lobata leaf ethanol extract (PLLEE) on lipogenesis in 3T3-L1cells during their differentiation from preadipocytes to adipocytes by measuring lipid accumulation and lipogenic-relatedfactors. Treatment with PLLEE reduced the lipid content in Oil-red O staining in a dose-dependent manner. In addition,PLLEE reduced the activity of glycerol-3-phosphate dehydrogenase. Moreover, PLLEE down-regulated acetyl-CoAcarboxylase (ACC) and fatty acid synthase mRNA expression. In conclusion, PLLEE has an anti-lipogenic effect in 3T3-L1 cells.
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