NIH3T3 세포주에서 LPS자극에 의한 분비백혈구단백분해효소억제제(SLPI)의 단백질증가와 성장인자들의 발현
Increased Protein of the Secretory Leukocyte Protease In hibitor(SLPI) and the Expression of Growth Factors in NIH3T3 Cells by LPS Stimulation
1
조회
0
다운로드
3
인용
0
참고문헌
초록
분비백혈구단백분해효소억제제 (SLPI)는 염 증 부 위 에서 중성구 엘라스타제에 의한 손상 작용에 대해 조직을보호하는 역할을 한다. SLPI의 새로운 기능에 대한 연구들은 단백질분해효소억제제 역할보다는 선천적 면역반응작용에 주로 관여 할 것임을 보고하였다. 따라서 본 연구는 섬유모세포 세포주(NIH3T3)에서 박테리아성지질다당류(LPS) 자극에 의한 SLPI의 기능을 확인하기 위하여LPS 처리에 따른 여러 성장 인자들과 비교하여 SLPI의발현을 알아보았다. 역전사효소 중합반응(RT-PCR)과 면역학적 단백질 검출법 (Western blot)은 LPS 처리 후SLPI와 몇 몇 성 장 인 자 들 (VEGF, bFGF, PDGF)의mRNA와 단백질의 검출을 위해 수행하였다. NIH3T3 세포주를 mL 당 100ng의 LPS에 각 각 30, 60, 90분, 24, 48시간 동안 노출시켰다. RT-PCR 결과 SLPI와 VEGFmRNA는 LPS 처리와는 상관없이 강한 발현 양상을 보였다. bFGF mRNA는 대조군과 같이 약하게 발현하였고,PDGF mRNA는 LPS 노출 시간에 따라 점진적으로 증가
Abstract
Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) involves tissue protection against the destructive action ofneutrophil elastase at the site of inflammation. Several studies on new functions of SLPI have demonstratedthat SLPI may play a primary role in innate immunity than protease inhibitor. To identify the function of SLPIof SLPI compared to other growth factors involving the LPS treatment. To address this, we performed thereverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blots for the detection of mRNA andprotein expression of the SLPI and some growth factors such as VEGF, bFGF, and PDGF-BB after LPSstimulation. NIH3T3 cells were exposed 100ng/mL Escherichia coliLPS for 30min, 60min, 90min, 24h, and48 h, respectively. The result of RT-PCR showed that SLPI and VEGF mRNA was expressed strongly inNIH3T3 without related to LPS stimulation. mRNA of bFGF was weakly expressed such as the expression ofthe control. PDGF mRNA expression gradually increased follows at time course. However, SLPI protein level¶ These two authors equally contributed to this work.