솔방울 추출물의 파이토케미컬 성분 평가 및 HaCaT 세포이동 평가
Effect of the Pine Cone Extract Phytochemical and Physiological activity on HaCaT Cells
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목적: 본 연구는 솔방울(pine cone)을 화장품 소재로서의 활용가능성을 확인하기 위하여 열수(WE), 주정(EE), 초임계방법(SFE)으로 추출하여 비교 실험을 진행하였다. 방법: 각 추출방법으로 얻은 추출물의 파이토케미컬 성분을 확인하고자GC/MS로 분석하였고, 총 폴리페놀 함량과 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼소거능으로 항산화 활성을 측정하였다. 또한 항균 및 항염증 효과를 비교 분석하였으며, 각 추출물을 에멀젼 제형에 첨가하여 안정성을 확인하였다. 결과: 총 폴리페놀 함량 측정한 결과 WE 는 180.75±1.83 mg/g, EE는 252.69±0.34 mg/g, SFE는 270.10±0.97 mg/g이 확인되었다. DPPH법을 이용한 항산화 효과 측정 시 SFE로 얻은 추출물이 저농도(0.125%)에서도 높은 항산화 능력을 나타내었다. 솔방울 추출물의 항균 효과를 측정한 결과 SEF 추출물은 SA에서 12.1±1.04 mm, SE에서 11.8±0.45 mm의 clear zone이 확인이 되어 기타 WE와 EE 추출물보다 높은 항균효과를 나타내었다. 세포독성 평가 결과 모든 추출물에서 80%이상의 세포생존율을 관찰하였다. 항염 실험에서 추출물 처리 시 LPS 처리군에 비해 nitric oxide 발현량이 유의성 있게 감소함을 확인하였다. 솔방울 추출물을 첨가한 에멀젼을 제조하여 안정성을 관찰한결과 SFE 추출물을 첨가한 emulsion만이 pH 및 고온(40℃)에서 안정함이 확인이 되었다. 결론: 본 연구를 통해 솔방울SFE추출물의 항염 및 피부재생 효과를 확인하였고, 앞으로 항염증 및 피부 재생 화장품 원료로서의 응용이 가능할 것으로 사료된다.
Abstract
Purpose: This study examines the properties and potential commercial value of the pine cones extract when used as bioactive and cosmetics ingredients. Methods: Pine cones were extracted with hot water (WE), 70% ethanol (EE), and supercritical fluid extraction (SFE) to examine their antioxidant properties on the basis of their total polyphenol content, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis. The antibacterial properties of the pine cone extract were also studied on 2 types of bacteria. In addition, this study examined the nitric oxide (NO) inhibition effect using RAW 264.7 cells, in which the inflammatory reaction was induced by lipopolysaccharides (LPS), and cell migration activity in the HeCaT cells. Results: The extract obtained with SFE exhibited high antioxidative ability even at low concentration (0.125%). The antimicrobial activity of the of SFE pine cone extract was 12.1±1.04 mm for Staphylococcus aureus (S. aureus) and 11.8±0.45 mm for Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis). Cytotoxicity evaluation showed cell viability above 80% in all extracts. During the antiinflammatory test, the nitric oxide expression level was low, and it was confirmed by the antiinflammatory effect. The results of the stability test showed that emulsions containing SFE extract were very stable. The pH and high temperature (40℃) of each emulsion containing SFE extract did not considerably change for 30 days. Conclusion: These findings suggest that SFE extract is a possible cosmeceutical material with potent skin regeneration and antiinflammatory properties.
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