인간 제대혈의 CD14+ 단핵구 세포 및 CD34+ 조혈모세포에서 유래된 수지상세포의 특성 비교
Comparison of characteristics of Dendritic Cells derived from CD 14+ Monocyte and CD34+ Hematopoietic Stem Cell in Human Umbilical Cord Blood
1
조회
0
다운로드
0
인용
0
참고문헌
키워드
초록
=목적: 제대혈의 CD14+ 단핵구 및 CD34+ 조혈모세포를 이용하여 동일한 배양조건에서 수지상세포로 분화시켜 얻은 각각의 수지상세포를 형태학적, 표현형적 및 기능적으로 비교 분석하여 그 특성을 알고 수지상세포를 이용한 항암면역치료에서 어떤 세포가 적합한 전구세포인지 판단하고자 한다. 연구 방법: 정상적인 만삭 산모를 대상으로 하여 태반이 만출 되기 전 채취된 제대혈에서 CD14+ 단핵구 (n=17)와 CD34+ 조혈모세포 (n=15)를 분리하여 GM-CSF (800 U/mL)과 IL-4 (500 U/mL)를 이용하여 수지상세포로 분화시킨 후 LPS (1 g/mL) 및 IFN-γ (1000 U/mL)를 이용하여 성숙시켜 confocal microscopy를 이용하여 형태학적 특성을 비교하였으며 FACS를 이용하여 표현형을 분석하였다. ELISA kit를 이용하여 수지상세포에서 생산된 IL-12p70의 양을 비교하였으며 혼합림프구 반응을 통해 T cell에 대한 증식능을 확인하였다. 결과: 단핵구 및 줄기세포에서 분화된 8일째 성숙 수지상세포는 형태학적으로 동일한 모양을 보였으며 CD80, CD83 및 CD86을 이용한 표현형 검사에서도 유사한 발현 정도를 보였다 (P>0.05). 기능적인 비교를 위한 혼합 림프구 반응에서도 모두 강력한 림프구 자극 작용을 보였으나 단핵구 기원의 수지상세포는 1:20의 비율에서 가장 강력한 효과를 보인 반면 조혈모세포 기원의 수지상세포는 1:2의 비율에서 가장 강력한 효과를 보이며 모든 비율의 혼합림프구 반응검사에서 단핵구 기원의 수지상세포에 비해 상대적으로 유의하게 높은 증식능을 보였다 (P<0.05). IL-12p70 정량검사에서 두 종류의 수지상세포 모두 6일째의 미성숙세포에서보다 8일째의 성숙세포에서 유의하게 높은 수치를 보였다 (P<0.05). 또한 조혈모세포 기원의 수지상세포에서 단핵구 유래 수지상세포에 비해 통계학적으로 높은 수치의 IL-12p70의 생산량을 보였다 (P<0.05).
참고문헌 (36)
- "The dendritic cell system and its role in immunogenicity", 9, pp.271~96 (1991)
- "Generation of dendritic cells from fresh and frozen cord blood CD34+ cells", 37, pp.362~371 (1998)
- "Reconstitution of cellular immunity against cytomegalovirus in recipients of allogeneic bone marrow by transfer of T-cell clones from the donor", 333, pp.1038~1044 (1995)
- "Generation of antigen- specific CD8+ CTLs from naive precursors", 153, pp.996~1003 (1994)
- "Effects of cytokines on the culture and differentiation of dendritic cells in vitro", 10, pp.43~51 (2001)
- "Origin, maturation and antigen presenting function of dendritic cells", 9, pp.10~16 (1997)
- "Generation of large numbers of dendritic cells from mouse bone marrow cultures supplemented with granulocyte", macrophage colony- stimulating factor, 1992, pp.176, 1693~702
- "Costimulatory function of umbilical cord blood CD14+ and CD34+ derived dendritic cells", 75, pp.18~33 (2003)
- "Searching for unrelated donor hematopoietic stem cells:availability and speed of umbilical cord blood versus bone marrow", 8, pp.257~260 (2002)
- "Results of unrelated umbilical cord blood hematopoietic stem cell transplant", 8, pp.146~154 (2001)
- "Graft-versus-host disease in children who have received a cord-blood or bone marrow transplant from an HLA- identical sibling Eurocord and International Bone Marrow Transplant Registry Working Committee on Alternative Donor and Stem Cell Sources", 342, pp.1846~1854 (2000)
- "Phenotypic alterations and IL- 1beta production in CD34(+) progenitor- and monocyte-derived dendritic cells after exposure to allergens: a comparative analysis", 294, pp.109~116 (2002)
- "Dendritic cells and their emerging clinical applications", 33, pp.479~492 (2001)
- "New insights into the mobilization and phagocytic activity of dendritic cells", 183, pp.1287~1292 (1996)
- "Dendritic cells and the control of immunity", 392, pp.245~252 (1998)
- "Dendritic cells", 72, pp.255~324 (1999)
- "Maturation stages of mouse dendritic cells in growth factor- dependent long-term cultures", 185, pp.317~328 (1997)
- "Dendritic cells (I) Biological functions", 46, pp.9~19 (2001)
- "The B7", BB1 antigen provides one of several costimulatory signals for the activation of CD4+ T lymphocytes by human blood dendritic cells in vitro, 1992, pp.90, 229~37
- "GM-CSF and TNF-alpha cooperate in the generation of dendritic Langerhans cells", 360, pp.258~61 (1992)
- "Immunobiology of dendritic cells", 18, pp.767~811 (2000)
- "CD34+ cell-derived CD14+ precursor cells develop into Langerhans cells in a TGF-beta 1-dependent manner", 163, pp.4869~4877 (1999)
- "Human umbilical cord blood as a potential source of transplantable hematopoietic stem", progenitor cells, 1989, pp.86, 3828~32
- "Distinct subsets of dendritic cells resembling dermal DCs can be generated in vitro from monocytes in the presence of different serum supplements", 238, pp.119~131 (2000)
- "Effect of interleukin-7 on the in vitro development and maturation of monocyte derived human dendritic cells", 51, pp.361~371 (2000)
- "Dendritic cells as the terminal stage of monocyte differentiation", 160, pp.4587~4595 (1998)
- "Expansion of Immunostimulatory Dendritic Cells from Peripheral Blood of Patients with Cancer", 2, pp.65~69 (1997)
- "CD34+ peripheral blood progenitor cell and monocyte derived dendritic cells:a comparative analysis", 99, pp.490~499 (1997)
- "Dendritic cells generated either from CD34+ progenitor cells or from monocytes differ in their ability to activate antigen-specific CD8+ T cells", 163, pp.3597~3604 (1999)
- "Generation of large numbers of fully mature and stable dendritic cells from leukapheresis products for clinical application", 223, pp.1~15 (1999)
- "CD34+ hematopoietic progenitors from human cord blood differentiate along two independent dendritic cell pathways in response to granulocyte-macrophage colony-stimulating factor plus tumor necrosis factor alpha: II. Functional analysis", 90, pp.1458~1470 (1997)
- "Generation of dendritic cells from human bone marrow mononuclear cells:advantages for clinical application in comparison to peripheral blood monocyte derived cells", 20, pp.247~253 (2002)
- "Development of a clinical-scale method for generation of dendritic cells from PBMC for use in cancer immunotherapy", 3, pp.19~29 (2001)
- "A closed and single-use system for monocyte enrichment:potential for dendritic cell generation for clinical applications", 43, pp.481~487 (2003)
- "Clinical and experimental uses of umbilical cord blood", 32, pp.601~609 (2002)
- "Hematopoietic engraftment and survival in adult recipients of umbilical-cord blood from unrelated donors", 344, pp.1815~1822 (2001)
