배양된 영양배엽세포에서 저산소 상태가 혈관내피 성장인자, 섬유아세포 성장인자에 미치는 영향

목적 : 임신초기 인간의 태반에서 분리하여 배양한 영양배엽세포에서의 VEGF 및 bFGF유전자의 mRNA발현에 저산소상태가 미치는 영향을 연구하고자 시행하였다.연구 방법 : 임신초기 (6-10주)에서 얻은 태반조직 5예를 이용하여 영양배엽세포를 분리한 후 정상산소상태 (5% CO2, 95% humid air in incubator) 및 저산소상태 (MERCK, 1% O2, 99% CO2)에서 각각 24시간, 48시간 및 72시간씩 배양하였다. 각각의 조건에서 배양한 영양배엽세포에서 총 RNA를 추출하여 VEGF 및 bFGF유전자의 mRNA 발현정도를 알아보기 위해 RT-PCR 및 Northern blot analysis를 시행하였다.결과 : RT-PCR에서 VEGF189는 배양하지 않은 군에 비해 24시간 이상의 배양군 모두에서 발현이 의의있게 증가되었으며 (p<0.05), 24시간 이상의 배양군에서는 저산소상태에서의 발현이 정상산소상태에 비해 모두 의의있게 증가하였다 (p<0.05). 한편, VEGF206의 경우에는 배양하지 않은 군에 비해 48시간 이상의 배양군 모두에서 발현이 의의있게 증가되었으며 (p<0.05), 48시간 이상의 배양군에서는 저산소상태에서의 발현이 정상산소상태에 비해 모두 의의있게 증가하였다 (p<0.05). Northern blot analysis를 시행한 결과, 저산소상태에서만 VEGF 유전자발현이 유도됨이 관찰되었다. 한편, RT-PCR에서 bFGF mRNA 발현이 배양하지 않은 군에 비해 24시간 및 48시간 배양군에서 의의있게 증가되었으며 (p<0.05), 또한 저산소상태에서의 발현은 정상산소상태에 비해 24시간 및 48시간 배양군에서 의의있게 증가하였다 (p<0.05). Northern blot analysis를 시행한 결과에서도 RT- PCR과 동일한 결과가 관찰되었다 (p<0.05).