HBsAg 돌연변이 위험군을 대상으로 한 국내 주요 면역검사법의 변이 검출능 평가 및 임상적 의의
Performance Evaluation of Immunoassay Detection of HBsAg Mutants and Their Clinical Significance in the High Risk Groups
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배경: B형간염바이러스(HBV) 감염 진단에는 B형간염표면항원(HBsAg)의 존재를 정확하게 검출하는 것이 중요하다. 그러나 간염백신, 간염치료제, 간이식 후 면역글로불린 사용 등으로 인하여HBsAg의 돌연변이종들이 점차 다양하게 증가하고 위음성 결과를초래한다는 보고들이 잇따르고 있다. 최근 주요 공급사들에서 이러한 돌연변이들을 더욱 잘 검출할 수 있도록 장비와 시약을 개발하여 소개하고 있으므로, 본 저자들은 돌연변이를 초래할 수 있는환자군들과 인위적으로 다양하게 제조한 유전자재조합 검체들을대상으로 주요 자동화 면역장비와 시약들을 이용하여 돌연변이군들에 대한 HBsAg 검출능을 조사하고자 하였다. 방법: Architecti2000sr analyzer (Abbott Laboratories, USA), Modularanalytics E170 system (Roche Diagnostics, Germany) 그리고ADVIA Centaur XP (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., USA)를사용하여 혈청검체은행에서 양성으로 확인된 검체, 항바이러스제치료를 받고 있는 만성B형간염 환자와 간이식 후 추적 관찰 중인환자의 검체 그리고 각 장비 회사가 제공한 재조합변이항원 검체들에 대한 HBsAg 정성검사와 정량검사 검출능을 비교해 보았다. 결과: 혈청은행에서 양성으로 확인된 검체, 항바이러스제 치료를받고 있는 만성B형 간염 환자들과 간이식 후 추적 관찰 중인 환자들의 검체들에서 3사간 불일치 결과를 보이는 검체는 없었다. 반면같은 제조사에서 제공한 재조합 검체들에서 변이항원 검출률이높았지만 다른 제조사에서 제공한 재조합 검체들에서는 검출률이 상대적으로 훨씬 더 낮았으며, 장비 별로도 불일치한 결과를 보였다. 또한 동일한 돌연변이종이라도 저농도 검체와 고농도 검체의양성률을 비교해 보면 고농도 검체에서 양성률이 높았으며, 장비별로도 불일치한 결과를 보였다. 결론: HBsAg 변이를 검출하지 못하면 HBV 진단을 놓칠 수 있다. 국내에서 널리 사용되는 위의 세 장비의 경우 돌연변이 발생이 높은 환자군을 대상으로 했을 때는 검출능의 차이를 보이지 않았으나 각 회사별로 제공한 자사 재조합 검체들을 대상으로 했을 때는양성률이 서로 상이하였다. 그러므로 재조합 검체들을 중심으로제품을 평가하면 안된다. 또한 변이종들에서 농도가 낮은 검체에서 검출률이 낮으므로 위음성의 가능성을 염두에 두어야 한다. 그러므로 낮은 농도의 변이종을 보다 잘 검출할 수 있는 제품의 개발이 필요하다. 본 연구에 다양한 환자 검체들을 추가하여 HBsAg 변이의 면역검사법의 검출능에 대한 연구가 더 필요할 것으로 사료된다.
Abstract
Background: False negative results have been reported in the immunodetection of hepatitis B virus (HBV) because of the existence of the various mutants of the virus, causing most suppliers to try to develop superior reagents by using highly sensitive and specific monoclonal or polyclonal antibodies. In this study, we evaluated the effectiveness of 3 newly developed reagents by major manufacturers by adopting automated methods with increased sensitivity and specificity in the detection and discrimination of native and recombinant mutant antigens. Methods: We analyzed samples confirmed positive for hepatitis B surface antigen (HBsAg), high-risk samples from chronic hepatitis patients treated with antiviral agents, and samples from patients who had undergone liver transplantation and were treated with high-dose hepatitis B immunoglobulin (HBIG) by using reagents and systems newly developed by Abbott Laboratories (USA), Roche Diagnostics (Germany), and Siemens Healthcare Diagnostics (USA). Recombinant sample panels from these manufacturers with low and high concentrations were also analyzed for comparing the 3 reagents. Results: There were no discrepant results among the various selected patient groups; however, for the recombinant mutant panels, all of the 3reagents showed highly positive detection rates for their corresponding mutant panels, but showed relatively discrepant mutant detection rates when cross-tested with the other mutant panels. Detection rates of the HBsAg mutant panels were higher at a higher concentration of the mutant samples, but were lower for the same mutant receptor sites at a lower concentration. Conclusions: The 3 major detection methods seem to recognize the major native mutants commonly encountered in clinical practice. However,in the case of recombinant mutants, we believe that our data are not to be interpreted as a reference standard for any reagent, because the results can only be validated for the reagents’ corresponding mutant panels; such results tend to be mutually exclusive, and the enough concentration of mutants was required to be adjusted for a comparative analysis.
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