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양배추 포스포리파제 D 활성에 미치는 포스포리파제 A2의 영향

Effect of Phospholipase A2 on the Activity of Cabbage Phospholipase D

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주제분류화학

초록

미치는 PLA2의 영향을 포스포티딜콜린(PC) 작은 이중막 베시클(SUV)을 이용하여 연구하였다. PLA2 의 존재하에서 PLD의 활성은 저해되었다. PLA2의 양을 증가시킴에 따라 PLD의 활성이 거의 모두 상실됨을 관 찰 할 수 있었다. 이러한 PLA2에 의한 저해 효과를 분석하기 위하여 그 생성물인 올리에이트(oleate)와 라이소 포스파티딜콜린(LPC)을 SUV에 각각 처리하고 PLD활성을 검토하였다. 그 결과 PLD의 활성은 외부에서 더해진 올리에이트에 의해 증가되었고, LPC에 의해서는 저해되었다. 그러나 이들 생성물들은 동시에 처리할 경우 PLA2 를 직접 처리한 결과와 같이 PLD활성이 저해되는 것으로 나타났다. 올리에이트의 PLD 활성화 효과는 포화된 다른 지방산 보다 더 좋았다. LPC의 저해 효과도 다른 라이소포스포리피드와 비교하였다. 라이소포스파티드 산 (LPA)을 제외하고 검토한 모든 라이소포스포리피드는 PLD의 활성을 저해하는 것으로 나타났다. LPA는 PLD의 활성을 상당량 증가시켰다. PLD활성에 대한 PLA2생성 분자들의 효과를 더 조사하기 위해 Michaelis-Menten kinetics와 함께 베시클 이중막의 안정성과 베시클 크기의 변화를 검토하였다. 본 실험 결과는 조건에 따라 PLA2 의 생성물이 세포내에서도 PLD의 활성을 조절 할 수 있다는 가능성을 보여주었다고 사료된다.

Abstract

As a model study for in vivo interplay between phospholipase D(PLD) and phospholipase A2(PLA2), effect of PLA2 on the activity of cabbage PLD was examined employing phosphatidylcholine(PC) small unilamellar vesicles( SUV). The PLD activity was inhibited in the presence of PLA2. Almost complete inhibition of PLD activity could be brought about with increasing amount of PLA2. In order to evaluate the inhibitory effect of PLA2, effects of its products LPC and oleate were examined by adding individually to the SUV. The exogenously added oleate enhanced the PLD activity, while the LPC inhibited the PLD activity. However, in combination of LPC and oleate, the PLD activity was inhibited as similariy to the PLA2 added directly to the assay system. The oleate enhancement effect was greater than the other saturated fatty acids examined. The inhibitory effect of LPC was also extended to other lysophospholipids. Among the lysophospholipids tested here, all except LPA inhibited the PLD activity. LPA showed marked activational effect. The modulational effect of the molecules produced by PLA2 on the PLD activity was further investigated by examining the stability of bilayer structure and the size of mixed vesicles in addition to carrying out the kinetics of Michaelis-Menten. The results presented here could show a possibility of in vivo clue for the modulation of PLD activity by the products of PLA2 under the certain experimental conditions.

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