혈부축어탕이 파골세포 분화 및 골흡수에 미치는 영향
Effects of Hyeolbuchugeo-tang on Osteoclast Differentiation and Bone Resorption
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초록
목적 : 본 연구는 혈부축어탕 추출물(HBC)이 골다공증에 미치는 영향을 평가하고자 설계되었다. 실험방법 : HBC가 파골세포 분화 및 관련 유전자 발현에 미치는 영향을 측정하기 위하여 RAW 264.7 cell에 RANKL을 처리하여 파골세포 분화를 유도하고 HBC를 각각 150, 350, 700 ㎍/㎖ 농도로 처리하였다. 파골세포 생성 정도를 측정하기 위하여 TRAP(+) MNCs를 계수하고 파골세포생성 관련 유전자인 TRAP, MMP-9, cathepsin K, NFATc1, c-Fos, MITF와 염증관련 인자인 iNOS, COX-2, TNF-α의 mRNA 발현을 측정하였다. 골흡수에 대한 평가를 위하여 calcium-collagen으로 제조된 인공뼈를 사용하여 bone pit 형성 정도를 현미경으로 관찰하였다. 결과 : HBC는 파골세포 형성을 억제하고, TRAP, MMP-9, cathepsin K, NFATc1, c-Fos, MITF의 발현을 억제하였으나 iNOS, COX-2, TNF-α 발현에는 영향을 주지 못했으며, 파골세포에 의한 bone pit 형성을 억제하여 골침식을 억제하였다. 결론 : 이상의 결과를 종합하여 볼 때 HBC는 RANKL 유도 파골세포 분화를 억제하고 파골세포의 분화 및 기능활성에 관련된 유전자의 발현을 조절하여 골흡수를 억제하는 것으로 나타나 골다공증의 예방 및 치료에 효과가 있을 것으로 사료된다.
Abstract
Objectives: This study was conducted to evaluate the effects of Hyeolbuchugeo-tang (HBC) on Osteoporosis. Methods: We induced RAW 264.7 cells to differentiate to Osteoclasts by RANKL and treated RANKL-induced RAW 264.7 cells with HBC (0, 150, 350, 700 μg/ml). To measure osteoclast differentiation and activation, we counted TRAP (+) MNCs and measured mRNA expressions of its related genes (TRAP, MMP-9, cathepsin K, NFATc1, c-Fos, MITF, iNOS, COX-2, TNF-α) by RT-PCR. To assess bone resorption, the Bone pit formation were examined under a microscope. Results: HBC decreased TRAP (+) MNCs and inhibited mRNA expressions of TRAP, MMP-9, cathepsin K, NFATc1, c-Fos, MITF in osteoclast. And HBC inhibited Bone pit formation. Conclusions: HBC inhibited osteoclast differentiation and activation and bone resorption. Taken together, these results indicate that HBC might have potentials for prevention and treatment of Osteoporosis.
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