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비단백질성 항균물질을 생산하는 김치발효용 내산성 Hetero 발효형 유산균주 선발

Selection of Acid-tolerant and Hetero-fermentative Lactic Acid Bacteria Producing Non-proteinaceous Anti-bacterial Substances for Kimchi Fermentation

이종훈|김혜림
한국미생물·생명공학회 (The Korean Society For Microbiology And Biotechnology)|2013.03|한국미생물·생명공학회지 (Microbiology and Biotechnology Letters)|제41권 제1호|pp. 119-127|DOI 10.4014/kjmb.1211.11005

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kimchiLeuconostocWeissellaLactobacillus sakeiacid-toleranceanti-bacterial substance
주제분류생물학

초록

선행연구에서 김치발효 후기의 우점종으로 알려진 Lactobacillus sakei의 생육을 저해하는 Leuconostoc 속 23균주와Weissella 속 45 균주를 김치로부터 분리, 동정하였다. 발효후기까지 생존할 수 있는 김치발효용 hetero 발효형 종균 선발을 위하여 이들 균주에 대한 내산성을 평가한 결과, Lc. mesenteroides CK0128, W. cibaria CK0633, W. cibaria KK0797 균주가 acetic acid와 lactic acid 혼합용액을 이용하여 pH를 4.3으로 조정한 MRS broth에서 상대적으로 높은생존율을 보였고, 다량의 세포 외 다당류를 생산하였다. 세균주가 생산하는 항균물질의 분자량은 3,000 Da 이하로 추정되며 Staphylococcus aureus와 Lb. sakei에 대한 생육저해를 나타내었다. 분획한 3,000 Da 이하의 조항균물질 모두가121oC, 15분의 열처리에도 항균활성을 유지함으로써 항균물질의 열에 대한 높은 안정성이 확인되었다. pH의 감소에 따른 항균활성의 증가가 pH 5 이하의 산성조건에서 확인되어,이들 항균물질은 pH 5 이하의 산성조건에서 활성을 갖는 것으로 추정된다. α-amylase, lipase, pepsin, proteinase K 처리가 항균활성에 아무런 영향을 미치지 않는 것으로 보아 이들 균주가 생산하는 항균물질은 탄수화물, 지질을 포함하지않으며, 비단백질성 물질로 추정된다. 또한, 선발균주가 생산하는 비단백질성 항균물질은 식중독균의 생육을 효과적으로 저해하였다.

Abstract

Twenty-three strains of Leuconostoc species and 45 strains of Weissella species inhibiting the growth of Lactobacillus sakei,one of the most populous lactic acid bacteria in over-ripened kimchi, were isolated from kimchi in our previous study. Among these hetero-fermentative 68 strains, Leuconostoc mesenteroides CK0128, Weissella cibaria CK0633, and W. cibaria KK0797exhibited a relatively high survival rate in MRS medium, which was adjusted to pH 4.3 using an acid mixture consisting of acetic and lactic acids, and produced a large amount of exopolysaccharides. The culture supernatants of 3 strains were fractionated by a molecular weight cutter and lyophilized. The fractions with a molecular weight smaller than 3,000 Da showed antagonistic activity against Staphylococcus aureus and Lb. sakei. The anti-bacterial substances were very stable to heat treatments (121oC, 15 min) and active at acidic conditions below pH 5. α-Amylase, lipase, and proteolytic enzymes (proteinase K and pepsin)did not affect their activities. These non-proteinaceous anti-bacterial substances inhibited the growth of several food pathogens.

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