다공성막이 혈액뇌관문 내피세포의 배양에 끼치는 영향
Effect of Porous Membrane on Culture Properties of Blood-Brain Barrier Endothelial Cell
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초록
소 뇌 미세혈관에서 분리한 내피세포(BBMECs)를 직경 3.0㎛ 및 0.4㎛인 구멍을 가지는 다공성막(Transwell)에서 일차배양하였을 때의 특징을 주사전자현미경을 사용하여 살펴보았다. 분리된 모세혈관의 작은 조각과 분리된 내피세포들은 콜라겐으로 도포한 배양기구의 표면에 고착되어 성장하였다. BBMECs들은 직경 0.4 ㎛인 다공성막의 위쪽 구획에서만 성장하였으나 직경 3.0㎛인 구멍을 가진 막에서는 세포들이 구멍을 통해 막의 반대쪽으로 이주하여 다공성막의 아래쪽 구획에서도 성장하여 세포단층을 형성하였다. 이상의 결과로 효소 처리에 의해 분리한 BBMECs는 직경 0.3 ㎛의 다공성막을 통과하나 직경 0.4 ㎛의 다공성막을 통과할 수 없음을 알 수 있었으며, 약물이동도를 관찰하는 실험이나 전기저항을 측정을 목적으로 하는 실험에서는 3.0㎛ 의 다공성막을 사용하는 대신 0.4㎛ 크기의 다공성막을 사용해야 한다는 것을 알 수 있었다
Abstract
The growth patterns of primary culture of bovine brain microvessel endothelial cells(BBMECs) were studied using scanning electron microscopy when grown on 3.0㎛ and 0.4㎛ pore Transwell. The capillary fragments and isolated endothelial cells grew on collagen coated culture plate and Transwell membrane. The BBMECs grew only on the upper surface of membrane of 0.4 ㎛. But BBMECs on 3.0㎛ pore membrane migrated through the pore and grew on the opposite side of the membrane. In summary, BBMECs isolated by enzyme digestion could migrate through 3.0㎛ pore membrane but not through 0.4 ㎛ pore membrane. So 0.4 ㎛ pore membrane instead of 3 ㎛ pore membrane should be used for drug transport experiment or transendothelial electrical resistance measurement.