모발 조직의 주사전자현미경 시료처리 및 관찰 기법
Observational Techniques and Sample Preparation of Hair for Scanning Electron Microscopy
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초록
본 연구는 주사현미경을 사용하여 모발을 연구하는 연구자들 에게 본 연구자의 숙련된 경험을 기술하여 양질의 주사전자현미 경 연구결과를 얻도록 하는데 목적이 있다. 주사전자현미경 관 찰을 위해서 모발조직은 탄소테이프가 부착된 지지대(stub) 보 다 구리테이프가 부착된 지지대를 사용하여야 한다. 모발시료는 가늘어서 탄소테이프가 부착된 지지대를 사용하면 바닥면이 함 께 촬영되어 배경이 지저분한 관찰 상을 얻게 된다. 모발은 수 분을 함유하고 있어서 자연 건조된 모발이라 하더라도 비결합수 가 존재하고 있다. 따라서 완벽한 탈수과정을 거쳐야 한다. 수 분이 완전히 제거되지 않은 모발을 관찰하였을 때 용출된 수분 에 의해서 모발 표면에 전자밀도가 높은 인공산물이 생성된다. 모발의 도금은 적정하게 이루어 져야 한다. 도금이 얇게 되면 하 전된 전자빔에 의해서 상이 흘러서 정확한 이미지를 얻을 수 없 다. 일반적으로 생물시료의 주사전자현미경 관찰에서 가속 전압 은 3kV로 관찰하지만 모발시료와 같이 각화된 조직의 경우 아 주 좋은 주사전자현미경 이미지를 얻기 위해서는 15kV에서 관 찰한다. 결론적으로 모발의 시료처리 과정서부터 고정, 탈수, 도 금 및 주사전자현미경 장비의 최적 촬영 조건을 이해하면 연구목적에 맞는 정확한 연구결과를 얻을 수 있다.
Abstract
To study using SEM, a stub that has copper tape attached was used for the hair tissue rather than a stub attached with carbon tape. This is because the hair sample is thin, which leads to scanning of the floor surface along with the hair when a stub with carbon tape is used. This results in an unclear image. Since hair contains moisture, even completely dry hair contains unbound water. Therefore, a complete dehydration process becomes necessary. When a hair is observed without having the water completely removed, artifacts with high electron density is generated by the water that leaks out on the hair surface. Coating by platinum needs to be carried out appropriately. If the coating is too thin, the image droops due to the electron beam that is electrically charged, making it impossible to acquire an accurate image. In general, when observing a biological sample using SEM, the accelerated voltage is set at 3kV, but if the object is a keratinized tissue, such as a hair sample, it is set at 15kV in order to acquire a good quality image. In conclusion, understanding the process of treating a hair sample, fixing, dehydrating and coating, as well as the conditions for taking the image of the SEM can lead to acquisition of an accurate image that befits the study purpose.
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